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            1. 技術服務

              細胞培養瓶的選擇


              細胞培養板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養孔的孔數有6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根據材質的不同有Terasaki板和普通細胞培養板。具體選擇時根據培養細胞的類型、所需培養體積及不同的實驗目的而定。

              (1)平底和圓底(U型和V型)培養板的區別和選擇

              不同形狀的培養板有不同用途。培養細胞,通常是選用平底的,這樣便于鏡下觀測、有明確的底面積、細胞培養液面高度相對一致。因此做MTT等實驗時,無論是貼壁和懸浮細胞,一般選用平底板。測吸光值一定要使用平底的培養板。要特別注意材質, 標示"Tissue Culture (TC) Treated"是養細胞用的。

              U型或V型板,一般在某些特殊要求時才使用。如在**學方面,當做兩種不同**細胞混合培養時,需要二者相互接觸刺激,這時一般會選用U型板,因為細胞會由于重力的作用而聚集在很小的范圍內內。圓底培養板還會用于同位素摻入的實驗,需要用細胞收集儀收集細胞的培養,如"混合**細胞培養"等。V型板常用做細胞殺傷、**學血凝集實驗。細胞殺傷這種實驗也可用U型板替代(加入細胞后,低速離心)。

              (2)Terasaki板和普通細胞培養板的區別

              Terasaki plate主要是用于晶體學研究,產品設計便于對晶體的觀察與結構分析。有兩種sitting 和handing drop兩種方法,兩種方法應用產品的外形結構也不同。材料上選擇crystal class polymer ,特殊的材料有利觀察晶體結構。

              細胞培養板主要是PS材料,材料是treated sufface,便于細胞貼壁生長與伸展。當然還有浮游細胞的生長材料,同時還有low binding surface

              (3)細胞培養板與酶標板的區別

              酶標板一般要比細胞培養板貴,細胞板主要做細胞培養,也可以用來測蛋白濃度;酶標板包括包被板和反應板,一般不用做細胞培養,它主要做**酶聯反應后的蛋白檢測,需要更高的要求和特定的酶標工作液。

              (4)常用不同培養板的孔底面積及推薦加液量

              不同孔板所加培養液的液面都不宜太深,一般在2~3mm范圍,結合不同孔的底面積就可算出各培養孔的適宜加液量(參考下表)。若加液量過多會影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動過程中易溢出造成污染。具體所加細胞密度依實驗的目的不同靈活掌握。

              常用的培養器皿

              培養器皿

              底面積(cm2

              加培養液量(mL)

              可獲細胞量

              96孔培養板

              0.32

              0.1

              105

              24孔培養板

              2

              1.0

              5×105

              12孔培養板

              4.5

              2.0

              106

              6孔培養板

              9.6

              2.5

              2.5×106

              4孔培養板

              28

              5.0

              7×106

              3.5cm培養皿

              8

              3.0

              2.0×106

              6cm培養皿

              21

              5.0

              5.2×106

              9cm培養皿

              49

              10.0

              12.2×106

              10cm培養皿

              55

              10.0

              13.7×106

              25cm塑料培養瓶

              25

              5.0

              5×106

              75cm塑料培養瓶

              75

              15~30

              2×107

              25cm玻璃培養瓶

              19

              4.0

              3×106

              100cm玻璃培養瓶

              37.5

              10.0

              6×106

              250cm玻璃培養瓶

              78

              15.0

              2×107

              2500cm旋轉培養瓶

              700

              100~250

              2.5×108

              注:各種單層生長的細胞在培養皿中長滿的細胞數,主要取決于器皿底表面積和細胞體積的大小。上表以Hela細胞為例給出的可獲細胞量僅作參考。

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